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WIWAM高通量植物表型成像分析平臺-中度干旱脅迫下生長反應(yīng)

更新時間:2022-05-24 點擊量:1725

大面積的可耕地經(jīng)常面臨不規(guī)則降雨,導(dǎo)致部分生長季節(jié)的可用水量有限,這就需要對植物的耐旱性進(jìn)行研究。在324份擬南芥自然材料中,觀察了中度干旱脅迫下生物量積累的自然變異。干旱脅迫下的改良表現(xiàn)與早花和缺乏春化需求相關(guān),表明開花時間和干旱反應(yīng)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)重疊,或這些性狀對自然選擇的相關(guān)反應(yīng)。此外,植株大小與相對含水量(RWC)呈負(fù)相關(guān),與絕對含水量(WC)無關(guān),表明可溶性化合物的作用顯著。控制和干旱條件下的生長隨時間而確定,并通過指數(shù)函數(shù)建模。通過對植物大小時間數(shù)據(jù)和模型參數(shù)的全基因組關(guān)聯(lián)(GWA)作圖,檢測到六個與干旱密切相關(guān)的時間依賴性數(shù)量性狀位點(QTL)。如果在單個時間點確定植株大小,大多數(shù)QTL將無法識別。對早期報道的干旱時基因表達(dá)變化的分析使我們能夠確定每個QTL最可能的候選基因。

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圖1. 蓮座鮮重(FW)(a)、相對含水量(RWC)(b)和指數(shù)模型參數(shù)的頻率分布

中度干旱脅迫下的生長減少導(dǎo)致實驗期間對照植物和干旱處理植物之間的植物大小差異增加。在干旱處理開始兩天后(第16 天),與對照相比,干旱導(dǎo)致的生長減少導(dǎo)致植株明顯變小。最后,在中等干旱脅迫下生物量平均減少 35%。然而,在對照和干旱條件下的種質(zhì)中觀察到植物大小的很大差異(圖 1a)。這些差異在很大程度上是由基因型決定的,因為在兩種條件下,花環(huán)的PLA和FW都具有中等至高度的遺傳力。

為了研究干旱條件下植物性能的自然變化是否與植物水分狀況有關(guān),在第24天測定每株植物最大葉片的RWC和WC。這兩個參數(shù)代表水分狀況的不同方面。 WC表示葉子中水的實際百分比,低 WC 表示葉子開始枯萎,代謝過程停止,從而阻止進(jìn)一步的生長。另一方面,RWC 將實際 WC 與*再水化葉子的 WC 進(jìn)行比較。含有較少水或較多可溶性化合物或兩者組合的葉子獲得低 RWC。植物在可用水量有限的情況下保持高 WC 的策略之一是增加葉子內(nèi)可溶性化合物的量,以改善流向葉子的水通量并限制蒸發(fā)。在應(yīng)用的中度干旱條件下未觀察到萎蔫,這對應(yīng)于在干旱條件下觀察到的所有植物的WC為75%或更高(圖1b)。缺乏萎蔫證實達(dá)到了施加溫和而不是嚴(yán)重干旱的目標(biāo)。WC的變化是有限的;93% 的所有植物(包括對照和中度干旱處理的植物)的水平在88%和93%之間,表明RWC的差異在很大程度上是由于內(nèi)部滲透勢的變化。在對照和干旱條件下的種質(zhì)之間觀察到 RWC 的變化(圖 1b)。

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圖2.兩個對干旱反應(yīng)相反的材料在控制和干旱脅迫條件下的生長曲線

種質(zhì)之間的差異不僅在兩種條件下觀察到植物大小,還觀察到干旱響應(yīng),從在對照和干旱條件下具有相似生長的種質(zhì)(圖 2a)到最終蓮座大小減少超過 50%(圖 2b)。此外,觀察到干旱時生長減少開始時間的變化。為了比較植物大小差異很大的種質(zhì)對干旱的生長響應(yīng),本文計算了對照和干旱條件下植物大小之間線性回歸的殘差。殘差代表在控制條件下與植物大小無關(guān)的干旱響應(yīng)。正殘差表示增長下降幅度小于平均值,而負(fù)殘差表示增長率下降幅度大于平均值。

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圖3.在第28天抽薹和不抽薹的植株之間的比較

早在第一個種質(zhì)開始抽薹之前(從第11天開始),早抽薹個體和晚期抽薹個體之間的植物大小存在顯著差異。在對照和干旱條件下,抽薹或開花植物在 28 天后具有比營養(yǎng)植物更大的蓮座(圖3a)。此外,以FW殘差為代表的干旱響應(yīng)在兩個抽薹時間等級中是相反的(圖3b)。早期抽薹種質(zhì)在干旱時表現(xiàn)優(yōu)于平均水平,而晚期抽薹型種質(zhì)表現(xiàn)低于平均水平。當(dāng)在冬季和夏季一年生植物之間進(jìn)行相同的比較時,觀察到類似的趨勢。

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圖4. Manhattan圖表示單核苷酸多態(tài)性(SNP)標(biāo)記與對照和干旱條件下的若干性狀之間的關(guān)聯(lián),以及表示干旱響應(yīng)的相應(yīng)殘差,與對照條件下的性狀值無關(guān)

6個QTL與控制條件下的模型參數(shù)相關(guān)(圖 4a),3個QTL 與控制條件下的FW和PLA相關(guān)(圖4d)。在干旱條件下,三個 QTL與FWand PLA 相關(guān)(圖 4e),另外三個與相應(yīng)的殘差相關(guān)(圖 4f)。對于干旱條件下的模型參數(shù)和相應(yīng)的殘差(圖 4b、c)、對照或干旱條件下的RWC或相應(yīng)的殘差(圖4g),沒有發(fā)現(xiàn)強關(guān)聯(lián)。每個SNP可以解釋總表型變異的6%到9%。對于與對照和干旱條件下的性狀相關(guān)的SNP,該百分比處于相同的范圍內(nèi)。這些百分比強調(diào)生物量積累是一個復(fù)雜的性狀,在控制和干旱條件下,它受許多小效應(yīng)基因的調(diào)控。

 

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